Rekombinant oqsil antigenlari ko'pincha bir nechta turli epitoplarga ega, ularning ba'zilari ketma-ket epitoplar, ba'zilari esa strukturaviy epitoplardir.Hayvonlarni denatüratsiyalangan antijenler bilan immunizatsiya qilish natijasida olingan poliklonal antikorlar alohida epitoplarga xos bo'lgan antikorlarning aralashmalari bo'lib, umuman olganda tabiiy tuzilmalarni yoki denatüratsiyalangan maqsadli oqsillarni aniqlash uchun ishlatilishi mumkin.Denatüratsiyalangan oqsillarni immunogenlar sifatida ishlatishning yon foydasi shundaki, denatüratsiyalangan oqsillar ko'proq immunogen bo'ladi va hayvonlarda kuchli immunitet reaktsiyasini rag'batlantirishi mumkin.
Escherichia coli ekspresyon tizimi odatda antigenik maqsadlar uchun tanlanadi, chunki bu vaqt va pul jihatidan eng qimmat tizimdir.Maqsadli oqsilni ifodalash imkoniyatini va tozalash qulayligini yaxshilash uchun ba'zida maqsadli oqsilning faqat kichik bir qismi, masalan, ma'lum bir domen ifodalanadi.
Oqsillarning uch o'lchovli tuzilishi
Proteinning o'ziga xos sohasi
Agar antikor tayyorlashdan maqsad faqat wb aniqlash uchun bo'lsa, antigen sifatida sintetik kichik peptiddan foydalanish tejamkor va tezdir, ammo peptid segmentining noto'g'ri tanlanishi tufayli zaif immunogenlik yoki regeniklik xavfi mavjud.Antikor tayyorlash uzoq vaqtni talab qilganligi sababli, tajribaning muvaffaqiyat tezligini ta'minlash uchun polipeptid antijeni yordamida antikorlarni tayyorlash uchun ko'pincha ikki yoki uch xil peptid segmentlari tanlanadi.
Immunizatsiya uchun polipeptid antijenining tozaligi 80% dan yuqori bo'lishi kerak.Yuqori tozalik nazariy jihatdan yaxshiroq o'ziga xoslikka ega bo'lgan antikorlarni olishi mumkin bo'lsa-da, amalda hayvonlar doimo ko'p miqdorda o'ziga xos bo'lmagan antikorlarni ishlab chiqaradi va shu bilan antigen tozaligining afzalliklarini yashiradi.
Bundan tashqari, kichik peptidlardan antikorlar tayyorlash, uning immunogenligini oshirish uchun tegishli tashuvchi antigen bilan o'zaro bog'langan bo'lishi kerak.Ikkita keng tarqalgan antijenik tashuvchilar KLH va BSA.
Xabar vaqti: 23-mart-2023-yil