HPLC nosozliklari va echimlariga eng moyil

Yuqori aniqlikdagi asbob sifatida HPLC, agar foydalanish paytida to'g'ri ishlatilmasa, osonlikcha ba'zi muammoli kichik muammolarga olib kelishi mumkin.Eng keng tarqalgan muammolardan biri ustunni siqish muammosidir.Noto'g'ri xromatografni qanday tezda bartaraf etish mumkin.HPLC tizimi asosan rezervuar shishasi, nasos, injektor, ustun, ustun harorat kamerasi, detektor va ma'lumotlarni qayta ishlash tizimidan iborat.Butun tizim uchun ustunlar, nasoslar va detektorlar asosiy komponentlar va muammolarga moyil bo'lgan asosiy joylardir.

Ustun bosimining kaliti HPLC dan foydalanganda diqqatni jalb qilish kerak bo'lgan joydir.Ustun bosimining barqarorligi xromatografik tepalik shakli, ustun samaradorligi, ajratish samaradorligi va ushlab turish vaqti bilan chambarchas bog'liq.Ustun bosimi barqarorligi bosim qiymatining barqaror qiymatda barqarorligini anglatmaydi, balki bosimning tebranish diapazoni 345kPa yoki 50PSI oralig'ida (ustun bosimi barqaror va sekin o'zgarganda gradient elyusiyasidan foydalanishga imkon beradi).Juda yuqori yoki juda past bosim ustun bosimi muammosidir.

HPLC nosozliklari va echimlariga eng moyil

1, yuqori bosim HPLC dan foydalanishda eng keng tarqalgan muammo hisoblanadi.Bu bosimning keskin ko'tarilishini anglatadi.Umuman olganda, quyidagi sabablar mavjud: (1) Umuman olganda, bu oqim kanalining bloklanishiga bog'liq.Shu o'rinda biz uni qismlarga bo'lib ko'rib chiqishimiz kerak.a.Birinchidan, vakuum nasosining kirish qismini kesib oling.Shu nuqtada, PEEK trubkasi suyuqlik bilan to'ldirilgan, shuning uchun PEEK trubkasi erituvchi shishasidan kichikroq bo'lib, suyuqlik o'z xohishiga ko'ra tomiziladimi yoki yo'qmi.Agar suyuqlik sekin tushmasa yoki tomizmasa, erituvchi filtr boshi bloklanadi.Davolash: 30% nitrat kislotada yarim soat davomida namlang va o'ta toza suv bilan yuving.Agar suyuqlik tasodifiy tushsa, hal qiluvchi filtr boshi normal va tekshirilmoqda;b.Mobil faza ustundan o'tmasligi uchun Tozalash valfini oching va bosim sezilarli darajada kamaymasa, filtr oq boshi bloklanadi.Davolash: filtrlangan oq dog'lar olib tashlandi va yarim soat davomida 10% izopropanol bilan sonikatsiya qilindi.Bosim 100PSI dan pastga tushsa, filtrlangan oq bosh normal va tekshirilmoqda;c.Ustunning chiqish uchini olib tashlang, agar bosim kamaymasa, ustun bloklanadi.Davolash: Agar bu tampon tuzining bloklanishi bo'lsa, bosim normal bo'lguncha 95% yuving.Agar obstruktsiya yuqori darajada saqlanib qolgan materialdan kelib chiqqan bo'lsa, normal bosimga shoshilish uchun hozirgi harakatlanuvchi fazadan ko'ra kuchliroq oqimdan foydalanish kerak.Agar uzoq muddatli tozalash bosimi yuqoridagi usul bo'yicha pasaymasa, ustunning kirish va chiqishi aksincha asbobga ulangan deb hisoblanishi mumkin va ustunni mobil faza bilan tozalash mumkin.Ayni paytda, agar ustun bosimi hali ham kamaymasa, ustunga kirish elak plitasi faqat almashtirilishi mumkin, lekin operatsiya yaxshi bo'lmagandan so'ng, ustun ta'sirining kamayishiga olib kelishi oson, shuning uchun kamroq foydalanishga harakat qiling.Qiyin muammolar uchun ustunni almashtirish ko'rib chiqilishi mumkin.

(2) Noto'g'ri oqim tezligini sozlash: To'g'ri oqim tezligini tiklash mumkin.

(3) Noto'g'ri oqim nisbati: oqimlarning turli nisbatlarining viskozite indeksi boshqacha va yuqori viskoziteli oqimning mos keladigan tizim bosimi ham kattaroqdir.Iloji bo'lsa, past viskoziteli erituvchilar almashtirilishi yoki qayta o'rnatilishi va tayyorlanishi mumkin.

(4) Tizim bosimining nol drifti: suyuqlik darajasi sensori nolini sozlang.

2, bosim juda past (1) odatda tizimning oqishi tufayli yuzaga keladi.Nima qilish kerak: Har bir ulanishni, ayniqsa ustunning har ikki uchidagi interfeysni toping va oqish joyini torting.Ustunni olib tashlang va PTFE plyonkasini tegishli kuch bilan torting yoki chizib qo'ying.

(2) Gaz nasosga kiradi, lekin bu vaqtda bosim odatda beqaror, yuqori va past.Yana jiddiyroq, nasos suyuqlikni o'zlashtira olmaydi.Davolash usuli: tozalash valfini oching va 3 ~ 5 ml / min oqim tezligida tozalang.Agar shunday bo'lmasa, havo pufakchalari maxsus igna trubkasi yordamida egzoz klapanida aspiratsiya qilingan.

(3) Mobil fazaning chiqishi yo'q: rezervuar shishasida mobil faza mavjudligini, lavabo mobil fazaga botiriladimi yoki yo'qligini va nasos ishlayotganligini tekshiring.

(4) Yo'naltiruvchi klapan yopiq emas: mos yozuvlar valfi sekinlashgandan keyin yopiladi.Odatda 0,1 ga tushadi.Yo'naltiruvchi valfni yopgandan keyin ~ 0,2 ml/min.

Xulosa:

Ushbu maqolada faqat suyuqlik xromatografiyasining umumiy muammolari tahlil qilinadi.Albatta, amaliy qo'llashimizda biz ko'proq boshqa muammolarga duch kelamiz.Xatolarni bartaraf etishda biz quyidagi tamoyillarga amal qilishimiz kerak: gipotetik omil va muammo o'rtasidagi munosabatni aniqlash uchun bir vaqtning o'zida faqat bitta omilni o'zgartirish;Odatda, muammolarni bartaraf etish uchun qismlarni almashtirishda, chiqindilarni oldini olish uchun demontaj qilingan buzilmagan qismlarni joyiga qo'yishga e'tibor qaratishimiz kerak;Yaxshi rekord odatni shakllantirish xatolarni hal qilish muvaffaqiyatining kalitidir.Xulosa qilib aytganda, HPLC dan foydalanganda namunani oldindan tozalashga, uskunaning to'g'ri ishlashiga va texnik xizmat ko'rsatishiga e'tibor berish muhimdir.